A novel PGA/TiO2 nanocomposite prepared with poly(γ-glutamic acid) from the newly isolated Bacillus subtilis 17B strain

Abstract

Poly(γ-glutamic acid) (PGA), naturally produced by Bacillus species, is a biodegradable, non-toxic, biocompatible, and non-immunogenic negatively charged polymer. Due to its properties, it has found various applications in the food, cosmetic and pharmaceutical industries. In this work, Bacillus subtilis 17B was selected as the best PGA producer among fifty wild-types Bacillus strains tested and characterized as a glutamate-independent producer. The production of PGA by the newly identified strain was optimized and increased tenfold using the Box-Behnken experimental design. The purity of PGA after recovery and purification from the fermentation broth was confirmed by SDS-PAGE followed by Methylene Blue staining. PGA was characterized by ESI MS and used for the preparation of a new nanocomposite with TiO2. The synthesis of PGA/TiO2 nanocomposite, its structural analysis, and cytotoxic effect on the cervical cancer cell line (HeLa cell) was investigated to determine the potential anti-cancer usage of this newly prepared material. Encouraging, PGA/TiO2 nanocomposite showed an increased cytotoxic effect compared to TiO2 alone.

Поли(γ-глутаминска киселина) (ПГK), коју производе бактерије рода Bacillus, је биоразградив, нетоксичан, биокомпатибилан и неимуноген негативно наелектрисани полимер. Због својих својстава нашао је разноврсну примену у прехрамбеној, козметичкој и фармацеутској индустрији. У овом раду, Bacillus ѕubtilis 17Б је изабран као најбољи ПГК продуцер међу педесетак тестираних природних изолата бактерија из овог рода и окарактерисан као глутамат независтан продуцер. Производња ПГК овим новоидентификованим сојем је оптимизована и десетоструко увећана коришћењем Box-Behnken експерименталног дизајна. Чистоћа ПГК након изоловања и пречишћавања из ферметационе течности је потврђена електрофорезом (SDS-PAGE) након бојења метиленским плавим. ПГК је окарактерисана масеном спекроскопијом (ESI MS) и коришћена за добијање новог нанокомпозита са ТiО2. Синтеза ПГК/ТiО2 нанокомпозита, његова структурна анализа и цитотоксични ефекат на ћелијску линију рака грлића материце (HeLa ћелије) је испитан да би се утврдила потенцијална употреба овог новодобијеног материјала у борби против ћелија рака. Нанокомпозит ПГК/ТiО2 показао је повећан цитотоксични ефекат на поменуте ћелије рака у поређењу са самим ТiО2.