Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN
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2020
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Identificar metabólitos séricos que refletem o estado e a gravidade da doença pode ajudar no diagnóstico e prognóstico, definir as melhores intervenções a serem aplicadas e o momento correto, bem como compreender o impacto da doença em todo o corpo. Com isso em mente, este estudo se propôs a medir o metabolôma do soro sanguíneo de 37 pacientes com sintomas de COVID-19 grave usando RMN de 1H. Os pacientes que foram positivos para SARS-CoV-2 por RT-qPCR foram agrupados como “COVID-19 grave” (P, vermelho, n = 21, Fig. 1), enquanto os pacientes negativos por RT-qPCR foram agrupados como “não COVID-19 grave” (N, azul, n = 16, Fig. 1). Essas amostras foram comparadas com as amostras de referência de voluntários
saudáveis (H, verde, n = 40, Fig. 1) retiradas antes de início da pandemia. Os grupos eram homogêneos em relação ao gênero, idade e comorbidades para evitar qualquer comparação tendenciosa. Os soros (200 µL) foram descongelados em gelo, misturados com 250 µL de óxido de deutério (D2...O 99,9%) em temperatura ambiente, centrifugados a 12,000 g por 2 min a 4 ° C e transferidos para tubos de RMN de 5 mm. Os metabólitos não polares (lipídios) foram isolados e analisados usando CDCl3 como solvente. Os espectros de alta resolução de RMN de 1H NOESY 1D, CPMG, DOSY editado e em 2D (TOCSY, HSQC) foram adquiridos no espectrômetro Bruker AVANCE III 600 MHz usando a sonda tripla inversa (TBI) a 25 °C. Os três grupos (P, N e H) foram
separados com facilidade em PCA e em PLSDA (Fig. 1) independentemente da matriz de dados usada. Os dados de RMN de 1H de NOESY, CPMG, editados por DOSY do soro ou de lipídios isolados acusaram diferenças evidentes entre os grupos analisados. Os efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos foram extremos e refletem todas as respostas do corpo ao vírus SARS-CoV-2. Especialmente os altos níveis de glicose chamam a atenção e a desproporção em níveis e tipos de lipídios. Enquanto o colesterol e os esteróis livres foram muito menores em pacientes com COVID-19 grave do que em controles saudáveis, as fosfocolinas e VLDL foram as mais abundantes. Além disso, a maioria (60-75%) dos metabólitos do soro sanguíneo aumentou em
pacientes com COVID-19 e em pacientes que foram negativos, porém com sintomas graves. Quando analisadas as vias metabólicas, muitas delas foram alteradas de maneira marcante devido à doença. Como por exemplo a biossíntese de aminoacil t-RNA, metabolismo de aminoácidos (glicina, serina e treonina), metabolismo de aminoácidos de cadeia ramificada (valina, leucina e isoleucina), metabolismo de glicerofosfolipídeos, entre outras vias. Finalmente, a RMN de 1H poderá ser usada com sucesso para classificar os pacientes graves devido múltiplas e várias alterações de metabólitos e níveis de lipídios no seu soro.
Кључне речи:
infeções virais / síndrome metabólica grave / viral infections / severe metabolic syndrome / NMR / SARS-CoV-2Извор:
XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online, 2020Издавач:
- Associação de Usuários de RMN - AUREMN
Институција/група
IHTMTY - CONF AU - Stanišić, Danijela AU - Jadranin, Milka AU - Tasić, Ljubica PY - 2020 UR - https://cer.ihtm.bg.ac.rs/handle/123456789/7278 AB - Identificar metabólitos séricos que refletem o estado e a gravidade da doença pode ajudar no diagnóstico e prognóstico, definir as melhores intervenções a serem aplicadas e o momento correto, bem como compreender o impacto da doença em todo o corpo. Com isso em mente, este estudo se propôs a medir o metabolôma do soro sanguíneo de 37 pacientes com sintomas de COVID-19 grave usando RMN de 1H. Os pacientes que foram positivos para SARS-CoV-2 por RT-qPCR foram agrupados como “COVID-19 grave” (P, vermelho, n = 21, Fig. 1), enquanto os pacientes negativos por RT-qPCR foram agrupados como “não COVID-19 grave” (N, azul, n = 16, Fig. 1). Essas amostras foram comparadas com as amostras de referência de voluntários saudáveis (H, verde, n = 40, Fig. 1) retiradas antes de início da pandemia. Os grupos eram homogêneos em relação ao gênero, idade e comorbidades para evitar qualquer comparação tendenciosa. Os soros (200 µL) foram descongelados em gelo, misturados com 250 µL de óxido de deutério (D2O 99,9%) em temperatura ambiente, centrifugados a 12,000 g por 2 min a 4 ° C e transferidos para tubos de RMN de 5 mm. Os metabólitos não polares (lipídios) foram isolados e analisados usando CDCl3 como solvente. Os espectros de alta resolução de RMN de 1H NOESY 1D, CPMG, DOSY editado e em 2D (TOCSY, HSQC) foram adquiridos no espectrômetro Bruker AVANCE III 600 MHz usando a sonda tripla inversa (TBI) a 25 °C. Os três grupos (P, N e H) foram separados com facilidade em PCA e em PLSDA (Fig. 1) independentemente da matriz de dados usada. Os dados de RMN de 1H de NOESY, CPMG, editados por DOSY do soro ou de lipídios isolados acusaram diferenças evidentes entre os grupos analisados. Os efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos foram extremos e refletem todas as respostas do corpo ao vírus SARS-CoV-2. Especialmente os altos níveis de glicose chamam a atenção e a desproporção em níveis e tipos de lipídios. Enquanto o colesterol e os esteróis livres foram muito menores em pacientes com COVID-19 grave do que em controles saudáveis, as fosfocolinas e VLDL foram as mais abundantes. Além disso, a maioria (60-75%) dos metabólitos do soro sanguíneo aumentou em pacientes com COVID-19 e em pacientes que foram negativos, porém com sintomas graves. Quando analisadas as vias metabólicas, muitas delas foram alteradas de maneira marcante devido à doença. Como por exemplo a biossíntese de aminoacil t-RNA, metabolismo de aminoácidos (glicina, serina e treonina), metabolismo de aminoácidos de cadeia ramificada (valina, leucina e isoleucina), metabolismo de glicerofosfolipídeos, entre outras vias. Finalmente, a RMN de 1H poderá ser usada com sucesso para classificar os pacientes graves devido múltiplas e várias alterações de metabólitos e níveis de lipídios no seu soro. PB - Associação de Usuários de RMN - AUREMN C3 - XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online T1 - Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN UR - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cer_7278 ER -
@conference{ author = "Stanišić, Danijela and Jadranin, Milka and Tasić, Ljubica", year = "2020", abstract = "Identificar metabólitos séricos que refletem o estado e a gravidade da doença pode ajudar no diagnóstico e prognóstico, definir as melhores intervenções a serem aplicadas e o momento correto, bem como compreender o impacto da doença em todo o corpo. Com isso em mente, este estudo se propôs a medir o metabolôma do soro sanguíneo de 37 pacientes com sintomas de COVID-19 grave usando RMN de 1H. Os pacientes que foram positivos para SARS-CoV-2 por RT-qPCR foram agrupados como “COVID-19 grave” (P, vermelho, n = 21, Fig. 1), enquanto os pacientes negativos por RT-qPCR foram agrupados como “não COVID-19 grave” (N, azul, n = 16, Fig. 1). Essas amostras foram comparadas com as amostras de referência de voluntários saudáveis (H, verde, n = 40, Fig. 1) retiradas antes de início da pandemia. Os grupos eram homogêneos em relação ao gênero, idade e comorbidades para evitar qualquer comparação tendenciosa. Os soros (200 µL) foram descongelados em gelo, misturados com 250 µL de óxido de deutério (D2O 99,9%) em temperatura ambiente, centrifugados a 12,000 g por 2 min a 4 ° C e transferidos para tubos de RMN de 5 mm. Os metabólitos não polares (lipídios) foram isolados e analisados usando CDCl3 como solvente. Os espectros de alta resolução de RMN de 1H NOESY 1D, CPMG, DOSY editado e em 2D (TOCSY, HSQC) foram adquiridos no espectrômetro Bruker AVANCE III 600 MHz usando a sonda tripla inversa (TBI) a 25 °C. Os três grupos (P, N e H) foram separados com facilidade em PCA e em PLSDA (Fig. 1) independentemente da matriz de dados usada. Os dados de RMN de 1H de NOESY, CPMG, editados por DOSY do soro ou de lipídios isolados acusaram diferenças evidentes entre os grupos analisados. Os efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos foram extremos e refletem todas as respostas do corpo ao vírus SARS-CoV-2. Especialmente os altos níveis de glicose chamam a atenção e a desproporção em níveis e tipos de lipídios. Enquanto o colesterol e os esteróis livres foram muito menores em pacientes com COVID-19 grave do que em controles saudáveis, as fosfocolinas e VLDL foram as mais abundantes. Além disso, a maioria (60-75%) dos metabólitos do soro sanguíneo aumentou em pacientes com COVID-19 e em pacientes que foram negativos, porém com sintomas graves. Quando analisadas as vias metabólicas, muitas delas foram alteradas de maneira marcante devido à doença. Como por exemplo a biossíntese de aminoacil t-RNA, metabolismo de aminoácidos (glicina, serina e treonina), metabolismo de aminoácidos de cadeia ramificada (valina, leucina e isoleucina), metabolismo de glicerofosfolipídeos, entre outras vias. Finalmente, a RMN de 1H poderá ser usada com sucesso para classificar os pacientes graves devido múltiplas e várias alterações de metabólitos e níveis de lipídios no seu soro.", publisher = "Associação de Usuários de RMN - AUREMN", journal = "XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online", title = "Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN", url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cer_7278" }
Stanišić, D., Jadranin, M.,& Tasić, L.. (2020). Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN. in XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online Associação de Usuários de RMN - AUREMN.. https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cer_7278
Stanišić D, Jadranin M, Tasić L. Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN. in XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online. 2020;. https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cer_7278 .
Stanišić, Danijela, Jadranin, Milka, Tasić, Ljubica, "Estudo dos efeitos da COVID-19 sobre metabólitos séricos utilizando RMN" in XVI Jornada Brasileira de Ressonância Magnética, 10 a 13 de novembro de 2020, evento online (2020), https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cer_7278 .